Z6·尊龙凯时乙型肝炎病毒(HBV)rcDNA探针法荧光定量PCR试剂盒是一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的高效检测试剂盒,具有以下优点:
产品特点
1. 即开即用:用户只需提供样品DNA模板,便可立即开始检测。
2. 高灵敏度:经过优化的引物等组分,确保了较高的灵敏度。
3. 陽性对照提供:该试剂盒附带阳性对照,便利于识别假阴性样品。
4. 高特异性:引物根据中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域设计,排除与其他生物样本DNA之间的交叉反应。
5. 定性和定量检测兼备:可进行定性和定量检测,定量检测的线性范围至少达到5个数量级。
6. 量大实惠:本产品可支持50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。
7. 仅限科研使用:本试剂盒仅适用于科研领域。
使用方法
一、样品DNA提取:采用用户自主选择的方法提取和纯化样品DNA,该试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
二、稀释标准曲线样品:为避免交叉污染,下面的稀释操作需在独立区域进行。
1. 标记六个离心管为7、6、5、4、3、2。
2. 用带芯枪头添加45μL的DEPC-H2O至每个管中。
3. 在7号管中加入5μL阳性对照(浓度为1×10E8拷贝/μL),震荡均匀后,可得1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品,冰上待用。
4. 根据上述步骤依次稀释至6个不同浓度的标准曲线样品,全部置于冰上待用。若不需要标准曲线,可将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL即可。
试剂准备与模板添加
三、试剂配制:准备N个待检样品的qPCR管(N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照),依据详细说明书添加各成分。
四、添加模板:在各qPCR管中加入2μL模板,加入顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板与阳性对照,离心30秒后立即进行扩增反应。
扩增反应与结果分析
五、扩增反应:将PCR管放置于扩增仪器样品槽中,执行扩增程序。
六、结果分析:若制作标准曲线,可通过阳性对照浓度的log值与Ct值绘制标准曲线。待测样品的Ct值可用于推算样品DNA浓度。如未制作标准曲线,可依据Ct值判断结果:阳性对照的Ct值应<30且呈S型曲线;阴性对照应存于Ct值38或无Ct值无显著增长;样本检测结果,Ct值<35则为阳性,38或无Ct则为阴性,35-38区间则需复检。
运输及保存
本产品需在低温条件下运输,建议于-20℃保存,有效期为一年。阳性对照应单独存置,避免与其他试剂交叉污染。Z6·尊龙凯时期待为您的科研提供高效、便捷的检测解决方案!